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超滤离心管超滤率受影响因素
发布时间:2020-01-17   点击次数:156次
   超滤常用于分离溶液中极其微小的颗粒和不溶分子。最终目的是较大限度的回收目标溶质。虽然分离效果受到包括化学性质、电荷等多种因素影响,这种方法主要还是以分子大小为基本的考虑。超滤膜截留1-1000kDa(MW)的分子,盐和水等小分子会透过,因此在大分子样品处理中得到了广泛应用。
  超滤离心管就是一个简单的可以承受高转速压力的管子,比如离一些样品,分离出上清沉淀。蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管。目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用,使用一次就扔掉太浪费。
  离心超滤管会有一个类似于内管和外管的两个部分,内管中是带有一定分子量的膜,当高速离心时,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即内管中),就是超滤的原理。
  超滤离心管超滤率受影响因素
  超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得较好好的效果。滤膜的通量的定义是流量除以面积,使用高 NMWL滤膜可以增加通量,但同时会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参与影响通量的因素很多,包括:压力:较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时,流量随着跨膜压力(TMP)的增大而增加。正压条件下操作,如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯,这种因素影响较为明显。如果极化影响显著,通量会达到一个平台,甚至可能随着压力的增加而降低。
  浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。温度:通常增加操作时的温度可以提高超滤效率。每增加1℃蛋白扩散率增加3-3.5%,同时溶液粘度降低。实践中一般是以样品和设备能耐 受的最高温度来操作。pH:改换溶液和/或pH常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的pI值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。
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